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黃曲霉毒素由黃曲霉、寄生曲霉、集峰曲霉和偽溜曲霉等多種真菌產生，屬于典型的生物源危害物。食品中常見的黃曲霉毒素有黃曲霉B₁、B₂、G₁、G₂和M₁。其中AFT B₁毒性最大，致癌性最強，廣泛分布在農作物的生長、收獲、儲存、運輸各個階段，對糧油作物、飼料、中草藥和堅果等產品及其加工制品造成了嚴重的污染。

圖1 黃曲霉B族和G族衍生前后的熒光強度比對

  根據不同研究表明，如圖1，AFT B₁在未進行光化學衍生前，熒光強度均低于40000，光化學衍生4min后，熒光強度均有增加，其中70%甲醇水中的AFT B₁熒光強度增幅最大。AFT G₁在100%乙腈中未進行光化學衍生的熒光強度最大，但引入水后（如80%乙腈水）發生了熒光淬滅，熒光強度大幅降低；經光化學衍生后在70%甲醇水中AFT G₁的熒光強度最大。AFT B₂和AFT G₂未進行光化學衍生和光化學衍生后的熒光強度相差不大，光化學衍生對其熒光強度無增強作用。

圖2  AFT B₂和AFT G₂化學結構式

圖3  AFT B₁和AFT G₁及其衍生物的化學結構式

本文參考食品安全國家標準《GB 5009.22-2016 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定 第三法 高效液相色譜法-柱后衍生法》，使用JADE PAK AF-C18 250mm×4.6mm 5μm（PN:0367-2546）色譜柱，U3000系統，黃曲霉毒素標準品在0.1ng/mL~10ng/mL范圍內線性回歸系數R2=0.999，AFT G₁和AFT B₂的分離度RS=1.81。

色譜條件

實驗譜圖

圖4  四種黃曲霉毒素光化學衍生譜圖（5ng/mL標準溶液）

圖5 AFT G₂校正曲線

圖6  AFT G₁校正曲線

圖7  AFT B₂校正曲線

圖8  AFT B₁校正曲線

 結論 

本方案使用JADE PAK AF-C18 250mm×4.6mm 5μm（PN:0367-2546）色譜柱，U3000系統，柱后光化學衍生，對AFT B₁、AFT G₁熒光增強效果顯著，且AFT B₂和AFTG₂熒光強度穩定，黃曲霉毒素最低檢測限為0.1ng/mL，標準品在0.1ng/mL~10ng/mL范圍內線性回歸系數R²=0.999，大大提高了檢測靈敏度。